浅析SEM扫描电镜生物样品制备技术

　　扫描电子显微镜，简称为扫描电镜，英文缩写为SEM（Scanning Electron Microscope）。它是用细聚焦的电子束轰击样品表面，通过电子与样品相互作用产生的二次电子、背散射电子等对样品表面或断口形貌进行观察和分析。SEM已广泛应用于材料、冶金、矿物、生物学等领域。

　　SEM扫描电镜由电子枪、电磁透镜、扫描线圈和样品室等部件组成。作用：获得扫描电子束、作为产生物理信号的激发源。为了获得较高的信号强度和图像分辨率，扫描电子束应具有较高的亮度和尽可能小的束斑直径。

　　电子枪利用阴极与阳极灯丝间的高压产生高能量的电子束。目前大多数扫描电镜采用热阴极电子枪。优点：灯丝价格便宜，真空要求不高；缺点：发射效率低，发射源直径大，分辨率低。现在，高等级扫描电镜采用六硼化铺（LaB6）或场发射电子枪，二次电子像的分辨率可达到2nm。扫描电镜的分辨率与电子在试样上的小扫描范围有关。通常电压为130kV。

　　SEM扫描电镜生物样品制备技术：

　　常规电镜样品要求：

　　必须是干燥的，不含水分或挥发性物质；

　　具有一定机械强度，能耐受电子束轰击；

　　具有导电性，被激发时能够产生足够的二次电子。

　　生物材料特点：含水分多，质地柔软，机械强度小；组成元素的原子序数低，导电性差，激发后二次电子的产额较少。

　　制样的任务：通过一系列处理，既要尽量保存材料的固有形态，又要改良其物理性能，使其适合在电镜下观察成像。